文章目录

1 材料与方法

1.1 样本采集地

1.2 样本采集方法

1.3 主要仪器与试剂

    1.3.1仪器设备

    1.3.2主要试剂

1.4 实时荧光定量PCR扩增

    1.4.1 蚤样品全基因组DNA的提取

    1.4.2 反应体系

    1.4.3 扩增程序

2 结 果

2.1 蚤类采集情况

2.2 RT-PCR结果

2.3 样品感染率

2.4 琼脂糖凝胶图像分析

3 讨 论

文章摘要:目的对青海省鼠疫主要宿主寄生蚤进行检测,观察立克次体感染情况。方法应用杀虫气雾剂喷杀兴海县、贵南县、玉树州捕获的鼠疫主要宿主喜马拉雅旱獭和青海田鼠,用检蚤镊采集其体表寄生蚤,经鉴定为4科5属6种共120匹。分别对采集的蚤样品单只提取DNA,采用实时荧光定量PCR法（real-time fluorescence quantitative PCR,RT-PCR）检测体表寄生蚤携带的立克次体,并将立克次体反应产物进行琼脂糖凝胶电泳。结果 120匹（♂50,♀70）体表寄生蚤中检出4匹立克次体阳性,扩增出目标带,证实有立克次体感染。结论首次自青海省鼠疫主要宿主体表寄生蚤检出立克次体病原,对鼠疫宿主检测及相关传染病的研究提供了基础数据。

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